NMDAR抗体技术新突破！海默医学联合多家医院优化方案获 IFCC 官方期刊认可

近日，海默医学携手四川省人民医院、四川大学华西第二医院、四川大学华西医院、河北医科大学第一医院、成都医学院等多所高校及医院科研团队，共同优化抗NMDAR抗体的检测方案，其研究成果发表于Clinica Chimica Acta【JCR Q1（医学检验技术）】。作为国际临床化学和实验室医学联合会（IFCC）的官方期刊，主要发表领域相关的原创研究，该平台的认可让我们备受鼓舞，也更坚定了我们深耕技术、服务临床的初心。

抗NMDAR脑炎是最为常见的自身免疫性脑炎，在女性和儿童中的发病率较高。早期准确检测抗 NMDAR 抗体对疾病诊断、治疗及预后至关重要，延误治疗会显著降低患者完全康复率，增加残疾和复发风险。

NMDAR离子通道是由NR1、NR2和NR3亚基组成的异四聚体复合物，其中最常见的组成形式为两个NR1亚基和两个NR2亚基。NR1亚基的 N368/G369 区域是介导免疫反应的主要抗原表位，为准确诊断抗NMDAR脑炎，检测针对NR1 亚基的免疫球蛋白G（IgG）抗体至关重要。尽管NR2亚基本身不具备NMDAR IgG 抗体的抗原表位，但当它与NR1亚基共表达时，仍能显著促进NR1在细胞膜上的定位。

传统抗体检测方法面临诸多瓶颈：如NR1-1a单亚基固定渗透法（F-CBA）易出现假阳性、假阴性结果，可能导致误诊漏诊；另有NR1/NR2B 双亚基共转染活细胞法（L-CBA）方法具有细胞毒性，需依赖昂贵拮抗剂，操作复杂且成本较高，难以在临床中广泛普及。

模型构建：

构建 6 种基于中国仓鼠卵巢 K1（CHO-K1）细胞系的检测模型，这些模型可表达NMDAR NR1和NR2B亚基的多种剪接变体，包括NR1-1a全长（模型I）与截短体（模型III）、NR1-1a全长与 NR2B全长共转染（模型II）、NR1-4a全长（模型IV）、NR1-1a与NR2B 融合蛋白（模型V）及NR1-1 的胞外域（ECD）与 NR2B 的长氨基端结构域融合（模型VI）。

图1.载体构建示意图（A：模型I（NR1-1a 全长） ；B：模型II（NR1-1a+NR2B 共转染）；C：模型 III（NR1 截短体）；D：模型 IV（NR1-4a 全长）；E：模型 V（NR1/NR2 融合蛋白）；F：模型VI（NR1 胞外结构域（ECD）+NR2B 氨基端长结构域（ATDL） 融合））

检测方法：采用活细胞检测法（L-CBA）、固定细胞检测法（F-CBA）、固定渗透细胞检测法（FP-CBA）三种 CBA 技术，结合组织检测法（TBA）进行验证。

数据分析：运用 GraphPad Prism 软件进行统计分析，评估各模型对NMDAR脑炎患者的诊断灵敏度（真阳性识别能力）、技术灵敏度（滴度检测极限），以及其对其他疾病对照组和健康对照组样本的特异性。

各模型的性能对比

模型I在脑脊液中的诊断灵敏度可达100%，而在血清中的诊断敏感度仅为83.3%，模型 II 仅分析共转染成功的细胞结果（L - CBA），其血清诊断灵敏度为66.7%，脑脊液诊断灵敏度为38.9%，模型 III 检测未能检测到任何阳性样本，诊断灵敏度为 0%。模型 IV 在 L-CBA 下诊断灵敏度表现最佳，血清和脑脊液均为100%；而模型 V 和 VI 在 F-CBA 下性能更优，其诊断灵敏度分别为94.4%（血清/脑脊液）和88.9%（血清/脑脊液）（图2）。

模型 V 的 F-CBA 方法展现出最高的技术灵敏度，这表明该模型识别 NMDAR 抗体的能力更强，能够有效检测低浓度抗体，从而显著降低临床漏诊风险（图3）。

图2.CBA滴度统计分析（左：模型IV；中：模型V；右：模型VI）

基于各细胞模型的特异性和灵敏度评估结果，本研究选取诊断灵敏度最高（100%）的模型IV（L-CBA） 与技术灵敏度最高的模型V（F-CBA），构建了联合检测方案：两种方法中任一检测结果为阳性，即判定为联合检测阳性，最终结果取两种方法中的最高滴度。与传统检测方法（模型I）相比，联合检测方案具有显著优势：其诊断灵敏度维持在 100%，高于模型I 的 83.3%，在技术灵敏度方面，联合检测的血清抗体滴度（P<0.0001）和脑脊液抗体滴度（P<0.05）均显著优于模型I(图3)。

图3.患者血清 / 脑脊液CBA滴度统计分析

（左：模型 I - VI 的血清滴度热图；中：模型 I - VI 的脑脊液滴度热图；右上：联合模型与模型I比较分析； 右下：模型 I-VI 之间比较分析）

其他结果

联合模型的脑脊液抗体滴度与NEOS评分（预后评估指标）显著正相关（相关系数 r=0.6817，P=0.0016），可更准确评估疾病严重程度。

所有CBA阴性的患者样本，经TBA检测均呈阳性，而对照样本在大鼠小脑的分子层和颗粒层中未产生任何特异性荧光信号，证实TBA 作为辅助检测方法，能够有效补充 CBA 的检测结果，提升 NMDAR 抗体检测的准确性和可靠性，联合检测可弥补单一模型的技术局限（图4）。

图4.大鼠小脑组织免疫荧光（TBA）图像

（A1-A3）P5 血清（SER）的大鼠小脑组织免疫荧光图像（放大倍数 100×、200×、400×），分子层（ML）呈现强荧光信号。

（B1-B3）H1（对照）血清（SER）的大鼠小脑组织免疫荧光图像（放大倍数 100×、200×、400×），未观察到特异性荧光信号。

ML：分子层（Molecular layer）；GL：颗粒层（Granular layer）。比例尺：100× 时为 100μm，200× 时为 50μm，400× 时为 25μm。

1.确立的 “NR1-4a 单亚基 L-CBA + NR1/NR2 融合蛋白 F-CBA” 联合方案，有效解决了传统检测方法的缺陷，显著提升了 NMDAR 抗体检测的准确性和可靠性。

2.该方案为抗 NMDAR 脑炎的早期诊断、治疗时机选择及预后评估提供了更可靠的技术支撑，有助于提高患者康复率，降低残疾和复发风险。

3.研究成果发表于 IFCC 官方期刊《Clinica Chimica Acta》，为全球抗NMDAR 抗体检测标准化提供了实践参考，也为其他异源多聚体蛋白自身抗体的 CBA 检测提供了新思路。

此次技术成果的发表，对我们而言是一份鼓励，更是一份前行的动力。IFCC 作为全球实验室医学领域的权威组织，其制定的标准与倡导的理念，一直是我们技术研发的重要遵循。

作为深耕第三方检测领域的一员，海默医学始终秉持 “技术服务临床” 的初心，未来将以此次发表为契机，继续打磨该检测方案的细节，提升技术稳定性与可重复性。同时，我们也期待与更多医疗机构、科研团队开放交流，探索更多适配临床需求的检测技术，为提升自身免疫性疾病诊断效率、改善患者预后贡献微薄之力。

参考文献

[1]He B, Gan J, Mao J, Wang X, Yang D, Peng T, Liu J, Jing X, Meng L, Peng Q. Optimized NMDAR autoantibody detection via combined NR1-4a LCBA and NR1/NR2 fusion FCBA. Clin Chim Acta. 2026 Jan 8;582:120834. doi: 10.1016/j.cca.2026.120834.